設(shè)備與管路的滅菌
在生物工業(yè)生產(chǎn)中,常采用經(jīng)濟、操作控制方便的加熱蒸汽滅菌方法。該方法就是利用水產(chǎn)生高溫蒸汽穿透微生物(包括細菌的芽孢、真菌的孢子或休眠體等耐高溫的個體)蛋白細胞,使其凝固、變性、腫脹、破裂,達到殺菌的目的。由于滅菌設(shè)備的種類、規(guī)格不同,所采用加熱蒸汽的溫度和時間不同。
不銹鋼鏡面發(fā)酵罐及容器的滅菌
發(fā)酵罐是生物工業(yè)生產(chǎn)重要的設(shè)備,發(fā)酵罐和容器在使用前必須經(jīng)耐壓和氣密性試驗。通常在設(shè)備安裝完畢或每次檢修后必須進行24h的氣密性試驗。檢查方法是維持溫度不變,檢查壓強是否穩(wěn)定。實際上,每次滅菌前這樣檢查太浪費時間,通??捎?0分鐘檢查罐的壓強是否改變來確定氣密性。檢查氣壓的壓力表必須方便滅菌,故壓力表和罐體連接管應(yīng)盡量短,同時盡可能裝設(shè)小蒸汽閥以確保滅菌*。
發(fā)酵罐和容器包括空罐、管道的加熱蒸汽滅菌過程如下:
1.發(fā)酵罐進行氣密性試驗確認無滲漏后,把所有的冷凝水排除閥打開后開啟進蒸汽閥,通入飽和蒸汽;
2.待有一定壓強后,打開排空氣閥,以便把容器中原有的空氣排除干凈,現(xiàn)代化的發(fā)酵罐排空氣閥上還連有過濾器防
止內(nèi)外環(huán)境污染。
3.當(dāng)管內(nèi)蒸汽壓力達到0.174MPA即129℃時,維持45min,對管內(nèi)和罐上連接的閥門進行滅菌,對于大型或者結(jié)構(gòu)復(fù)雜的罐和容器,也可采用抽真空法排除空氣,并使蒸汽通過,達到死角滅菌,注意在保壓過程中,應(yīng)不斷排出蒸汽管路及罐內(nèi)的蒸汽冷凝水;
4.當(dāng)達到工藝滅菌要求后,就結(jié)束滅菌操作。關(guān)閉蒸汽閥,待罐內(nèi)壓力低于空氣過濾壓力時,打開無菌空氣進口閥,通入無菌空氣保持罐壓0.098MPa,以確保罐內(nèi)蒸汽冷凝后不致形成真空而導(dǎo)致二次污染,待用。
發(fā)酵罐及其他容器上滅菌蒸汽管路的安排比較簡單,通常蒸汽進口裝在罐頂,冷凝水排出閥在罐底,無菌空氣分布器從罐底進入。